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实验总则1

第一篇 基础免疫学实验5

第一章 抗体的制备技术5

第一节 多克隆抗体制备5

第二节 单克隆抗体制备9

第三节 蛋白质的分离纯化15

第二章 抗原抗体反应19

第一节 凝集类实验19

第二节 沉淀类实验28

第三节 免疫浊度实验39

第三章 免疫酶测定技术42

第一节 酶标记抗体的制备42

第二节 酶联免疫吸附实验43

第三节 酶免疫组化技术51

第四章 放射性免疫标记技术53

第一节 抗原放射性核素标记53

第二节 放射免疫分析技术55

第三节 免疫放射分析57

第四节 生物合成过程的标记58

第五章 免疫荧光技术60

第一节 直接免疫荧光法测抗原60

第二节 间接免疫荧光法测抗体62

第六章 金免疫技术64

第一节 胶体金与免疫金的制备64

第二节 斑点金免疫渗滤实验66

第三节 斑点免疫层析实验68

第四节 免疫金（银）光镜染色技术69

第五节 免疫金电镜染色技术70

第七章 补体的测定与补体结合实验73

第一节 血清补体总活性测定73

第二节 补体旁路活化途径的溶血活性（ACH50）测定75

第三节 补体单个成分的测定76

第四节 补体结合实验78

第八章 化学发光免疫分析技术80

第一节 发光酶免疫测定80

第二节 化学发光免疫测定技术82

第三节 电化学发光免疫测定技术84

第四节 酶标记化学发光法测AFP86

第九章 免疫印迹88

第一节 蛋白质抗原电泳分离88

第二节 蛋白质的转膜94

第三节 免疫检测98

第四节 蛋白印迹在免疫学中的应用101

第五节 DNA印迹103

第六节 RNA印迹109

第七节 蛋白印迹117

第八节 免疫染色126

第十章 免疫细胞分离146

第一节 外周血单个核细胞的分离146

第二节 白细胞低渗分离法148

第三节 T细胞分离151

第四节 B细胞的磁珠分离法153

第五节 中性粒细胞分离155

第六节 单核细胞的分离156

第十一章 免疫细胞与细胞因子测定技术159

第一节 淋巴细胞转化试验——形态学检测法159

第二节 T淋巴细胞增殖实验——MTT法161

第三节 溶血空斑实验163

第四节 炎症介质释放实验164

第五节 细胞因子生物学活性检测法166

第六节 细胞因子mRNA的检测（RT-PCR法）174

第七节 细胞因子免疫学检测法——ELISA法177

第八节 细胞因子检测试剂盒简介178

第十二章 细胞体外培养方法180

第一节 细胞培养简介180

第二节 常见器械的准备181

第三节 常用培养液的配制183

第四节 常见体外细胞的培养方法184

第五节 细胞的计数、分装与培养185

第十三章 流式细胞技术及其应用190

第一节 流式细胞仪简介190

第二节 流式细胞术在免疫学检查中的应用192

第三节 流式细胞仪的分析及分选原理196

第四节 流式细胞仪数据的显示与分析202

第五节 流式细胞仪免疫检测样品制备206

第六节 免疫分析中常用的荧光染料与标记染色208

第七节 流式细胞术分析淋巴细胞亚群212

第八节 MultiSET四色免洗淋巴细胞亚群的绝对计数216

第九节 HLA-B27分析和软件操作217

第十节 细胞DNA测定218

第十一节 流式细胞术检测胞内抗原219

第十四章 非特异免疫功能测定222

第一节 中性粒细胞吞噬率与吞噬指数测定222

第二节 白细胞杀菌能力测定223

第三节 中性粒细胞硝基四氮唑蓝（NBT）还原实验224

第四节 小白鼠碳粉廓清实验226

第五节 溶菌酶测定法227

第六节 巨噬细胞吞噬功能检测法229

第七节 NK细胞活性的检测233

第十五章 分子生物学技术236

第一节 PCR236

第二节 反转录PCR246

第三节 实时荧光定量PCR254

第二篇 临床免疫学技术262

第十六章 感染性疾病的免疫学检测262

第一节 抗链球菌溶血素“O”抗体测定262

第二节 TORCH抗体测定263

第三节 甲型肝炎病毒IgM抗体测定265

第四节 梅毒螺旋体血清学检测266

第五节 轮状病毒感染的免疫学检测268

第十七章 自身免疫性疾病的免疫学检测270

第一节 类风湿因子测定270

第二节 抗核抗体测定272

第三节 抗双链DNA抗体测定273

第四节 ENA抗体测定277

第五节 抗组蛋白抗体测定278

第六节 抗乙酰胆碱受体抗体测定279

第七节 抗甲状腺球蛋白抗体的测定281

第十八章 免疫缺陷性疾病的免疫学检测283

第一节 外周血CD4＋和CD8＋T细胞检测283

第二节 HIV蛋白的检测284

第十九章 肿瘤与免疫增殖疾病的免疫学检验290

第一节 肿瘤标志物的检测290

第二节 肿瘤抗体的检测292

第三节 血清中异常免疫球蛋白的检测293

第二十章 超敏反应性疾病的免疫学检测297

第一节 特异性过敏原体外实验检测方法297

第二节 特异性过敏原体内检测方法309

第三节 变应原浸液制备的工艺流程320

附录一 实验动物329

第一节 实验常用动物329

第二节 实验动物的抓取与固定331

第三节 动物接种技术333

第四节 实验动物采血技术334

第五节 实验动物的处死336

附录二 部分免疫学实验仪器设备使用简介338

附录三 免疫学实验常用试剂及配制方法351

附录四 医学免疫学理论与技术在蒙医药研究中的应用358